The lncRNA H19 promotes epithelial to mesenchymal transition by functioning as miRNA sponges in colorectal cancer

日期：2016-09-01 標(biāo)簽：H19,miR138,miR200a

The lncRNA H19 promotes epithelial to mesenchymal transition by functioning as miRNA sponges in colorectal cancer

在結(jié)腸癌細(xì)胞中lncRNA H19作為miRNA的海綿體促進(jìn)EMT進(jìn)程

（IF=5.0）

文章思路：

H19作為miR-138、miR-200a的海綿吸附體，即ceRNA(內(nèi)源性競(jìng)爭(zhēng)RNA)，通過調(diào)節(jié)miR-138、miR-200a，來調(diào)節(jié)Vimentin、ZEB1與ZEB2的表達(dá)，從而調(diào)節(jié)EMT進(jìn)程。

核心Figure：

A圖：構(gòu)建過表達(dá)H19穩(wěn)轉(zhuǎn)株（HT29/SW620細(xì)胞），B圖：H19過表達(dá)細(xì)胞形態(tài)（HT29/SW620細(xì)胞），間充質(zhì)細(xì)胞更接近于長(zhǎng)梭形，細(xì)胞極性更小，C圖：western檢測(cè)EMT過程中的標(biāo)志性蛋白，Ecadherin 蛋白表達(dá)下降，Vimentin蛋白表達(dá)上升。D、E圖：Transwell實(shí)驗(yàn)，間充質(zhì)細(xì)胞具有更強(qiáng)的細(xì)胞遷移能力。

A圖：AGO2-RIP，主要用于驗(yàn)證microRNA與lncRNA互作。B圖：生物信息學(xué)預(yù)測(cè)miR138與miR200a與 H19的結(jié)合位點(diǎn)，C圖：qPCR檢測(cè)miR138與miR200a對(duì)H19的mRNA的影響，miRNA不會(huì)影響其ceRNA的表達(dá)。D圖：luciferase驗(yàn)證miR138與miR200a與H19的結(jié)合活性。

A圖：qPCR檢測(cè)miR138對(duì) Vimentin的mRNA表達(dá)水平的影響。B圖：western檢測(cè)miR138對(duì) Vimentin的蛋白表達(dá)水平的影響C圖：luciferase實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR138與Vimentin 編碼區(qū)的結(jié)合。A、B、C圖miR138對(duì) Vimentin的編碼區(qū)結(jié)合，并降解Vimentin的mRNA. D圖：qPCR檢測(cè)H19過表達(dá)細(xì)胞中Vimentin的mRNA表達(dá)水平，E圖：western檢測(cè)H19過表達(dá)細(xì)胞中Vimentin的蛋白表達(dá)水平。luciferase實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證H19過表達(dá)細(xì)胞對(duì)Vimentin 編碼區(qū)的的影響。

本公司可進(jìn)行類似實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及整體實(shí)驗(yàn)外包項(xiàng)目。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目可包括慢病毒穩(wěn)轉(zhuǎn)株的建立（過表達(dá)/敲低），qPCR、western、細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)（Transwell、細(xì)胞增殖-CCK8、劃痕、細(xì)胞流式-周期/凋亡檢測(cè)等）AGO2-RIP、生物信息學(xué)預(yù)測(cè)、luciferase。（紅色標(biāo)識(shí)為我公司主營項(xiàng)目）

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