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產(chǎn)品名稱：Promoter活性Luciferase實(shí)驗(yàn)服務(wù)
品牌名稱：廣州賽誠生物科技有限公司
所屬分類：基因表達(dá)調(diào)控專題實(shí)驗(yàn)
貨號：
規(guī)格：
目錄價(jià)格：0 元
- 產(chǎn)品描述
- 品牌介紹
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轉(zhuǎn)錄因子是一種具有特殊結(jié)構(gòu)、行使調(diào)控基因表達(dá)功能的蛋白質(zhì)分子，也稱為反式作用因子。某些轉(zhuǎn)錄因子僅與其靶啟動(dòng)子中的特異序列結(jié)合，這些特異性的序列被稱為順式因子，轉(zhuǎn)錄因子的DNA結(jié)合域和順式因子實(shí)現(xiàn)共價(jià)結(jié)合，從而對基因的表達(dá)起抑制或增強(qiáng)的作用。螢光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)（luciferase Assay）是檢測這類轉(zhuǎn)錄因子和其靶啟動(dòng)子中的特異順序結(jié)合的重要手段，其原理簡述如下：（1）用靶啟動(dòng)子的特定片段替換報(bào)告基因質(zhì)粒（如pGL3-basic）的啟動(dòng)子區(qū)。（2） 將要檢測的轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)質(zhì)粒與報(bào)告基因質(zhì)粒共轉(zhuǎn)。如果該轉(zhuǎn)錄因子能夠激活靶啟動(dòng)子，則螢光素酶就會(huì)表達(dá)，且其表達(dá)量與轉(zhuǎn)錄因子的作用強(qiáng)度成正比。（3） 加入特定的底物，螢光素酶與底物反應(yīng)，產(chǎn)生螢光素，檢測熒光的強(qiáng)度可以對螢光素酶的活性定量，進(jìn)而判斷該轉(zhuǎn)錄因子能否與靶啟動(dòng)子片段發(fā)生作用 （及其作用強(qiáng)度）。
Promoter活性Luciferase實(shí)驗(yàn)常用載體——pGL4
Promoter片段缺失Luciferase分析
PCR擴(kuò)增Luciferase點(diǎn)突變靶基因
服務(wù)流程
1. PCR擴(kuò)增靶基因的Promoter，或直接合成結(jié)合位點(diǎn)序列；
2. 片段裁切或點(diǎn)突變設(shè)計(jì)靶基因的Promoter并以PCR擴(kuò)增，或直接合成序列；
3. 將上述不同DNA片段分別克隆至報(bào)告載體pGL4質(zhì)粒；
4. 將報(bào)告載體轉(zhuǎn)染待檢細(xì)胞；
5. 多功能酶標(biāo)儀檢測報(bào)告基因的表達(dá)水平。
客戶提供
1. 目的基因、目的miRNA的相關(guān)信息；
2. 目的miRNA的模擬物（mimic）或抑制物（inhibitor）；
3. 作克隆模板用途的細(xì)胞或組織樣品；
4. 需轉(zhuǎn)染并作最后檢測用途的細(xì)胞樣品。
賽誠提供
1. 原始數(shù)據(jù)、結(jié)果圖片；
2. 標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)報(bào)告；
3. SCI標(biāo)準(zhǔn)Result Figure。
