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dCas9定點(diǎn)調(diào)控表觀遺傳

概要

1.設(shè)計(jì)sgRNA

2.構(gòu)建sgRNA表達(dá)載體

3.構(gòu)建dCas9-p300組蛋白乙?；到y(tǒng)，dCas9-LSD1組蛋白去甲基化系統(tǒng)，dCas9-Tet1-CD DNA去甲基化系統(tǒng)，dCas9-DNMT3A DNA甲基化系統(tǒng)

4.建立dCas9-SAM穩(wěn)轉(zhuǎn)株、dCas9-KRAB穩(wěn)轉(zhuǎn)株

5 .轉(zhuǎn)染sgRNA

6 .ChIP檢測(cè)dCas9系統(tǒng)的靶向效率

7 .qPCR或WB檢測(cè)下游基因表達(dá)

• 1 . CRISPR-Cas9基因沉默
• 2 . CRISPR-Cas9基因敲入
• 3 . dCas9定點(diǎn)調(diào)控表達(dá)
• 4 . dCas9定點(diǎn)調(diào)控表觀遺傳
• 5 . dCas9介導(dǎo)轉(zhuǎn)錄調(diào)控