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dCas9定點(diǎn)調(diào)控表達(dá)

dCas9定點(diǎn)表達(dá)調(diào)控

概要

1.設(shè)計(jì)sgRNA

2.構(gòu)建sgRNA表達(dá)載體

3.構(gòu)建dCas9-SAM基因激活表達(dá)載體,dCas9-KRAB基因沉默表達(dá)載體

4.建立dCas9-SAM穩(wěn)轉(zhuǎn)株、dCas9-KRAB穩(wěn)轉(zhuǎn)株

5 .轉(zhuǎn)染sgRNA

6 .ChIP檢測(cè)dCas9系統(tǒng)的靶向效率

7 .qPCRWB檢測(cè)下游基因表達(dá)


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