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核質(zhì)分離

核質(zhì)分離是檢測(cè)某種RNA或蛋白質(zhì)在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中含量的一種方法，根據(jù)細(xì)胞膜和核膜溶解的難易用不同強(qiáng)度的裂解液溶解細(xì)胞，達(dá)到細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核物質(zhì)分離的效果。分離的產(chǎn)物通過q-pcr或WB分別檢測(cè)目的RNA或蛋白在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中的含量。

核質(zhì)分離質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)：

核質(zhì)分離提取RNA用actin和U6的mRNA作為內(nèi)參，actin mRNA基本位于細(xì)胞質(zhì)中，U6 mRNA基本位于細(xì)胞核。分離的RNA產(chǎn)物用actin和U6進(jìn)行q-pcr檢測(cè)，確定核質(zhì)分離是否成功。

核質(zhì)分離提取蛋白用Histone和GAPDH作為內(nèi)參標(biāo)準(zhǔn)，Histone基本位于細(xì)胞核內(nèi)，GAPDH基本位于細(xì)胞質(zhì)中。分離提取的蛋白產(chǎn)物分別用Histone和GAPDH抗體進(jìn)行WB檢測(cè)核質(zhì)分離分離是否成功。

• 1 . 基因表達(dá)調(diào)控
  • 1.1. 表觀遺傳修飾調(diào)控
  • 1.2. 轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控
  • 1.3. 轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控
• 2 . 基因表達(dá)調(diào)控實(shí)驗(yàn)技術(shù)
  • 2.1. CHIP 染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)
  • 2.2. RIP RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀技術(shù)
  • 2.3. CHIRP 免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)
  • 2.4. CLIP實(shí)驗(yàn)技術(shù)
  • 2.5. RNA pull-down
  • 2.6. DNA pull-down
  • 2.7. RNA-RNA pull-down
  • 2.8. Luciferase 熒光素酶實(shí)驗(yàn)
  • 2.9. DNA/RNA EMSA 凝膠電泳遷移實(shí)驗(yàn)
  • 2.10. FISH 免疫熒光原位雜交技術(shù)
  • 2.11. ?核質(zhì)分離