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廣州賽誠生物科技有限公司
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熒光素酶檢測技術(Luciferase)實驗常見問題

為取得最佳測定效果,在用單管的熒光測定儀測定時,樣品和測定試劑混合后到測定前的時間應盡量控制在相同時間內,例如30秒內。

由于溫度對酶反應有影響,所以測定時樣品和試劑均需達到室溫后再進行測定。

為保證熒光素酶檢測試劑的穩(wěn)定性,可以采取適當分裝后避光保存的方法,以避免反復凍融和長時間暴露于室溫。一般來說,如果不分裝使用三次(期間凍融三次),對測定結果無明顯影響。

樣品和測定試劑混合后,必須等待1-2秒,再進行測定。測定時間通常為10秒,根據情況也可以測定更長或更短時間,但是同一批樣品最好使用相同的測定時間。

為避免由于質粒轉細胞時效率的差異而帶來的誤差,可以同時轉入Renilla熒光素酶的報告基因質粒作為內參,采用雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒進行檢測;也可以同時轉入β-半乳糖甘酶報告基因質粒作為內參,然后采用β-半乳糖苷酶報告基因檢測試劑盒進行檢測。采用熒光素酶報告基因檢測試劑盒中的報告基因細胞裂解液裂解獲得的樣品,可以直接用于β-半乳糖苷酶報告基因檢測試劑盒中的測定。

為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

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