廣州市黃埔區(qū)學(xué)大道攬?jiān)侣窂V州企業(yè)孵化器B座402
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項(xiàng)目名稱(chēng):慢病毒敲減穩(wěn)定株的構(gòu)建
所屬分類(lèi):慢病毒實(shí)驗(yàn)
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技術(shù)服務(wù)描述
HIV慢病毒包裝
HIV慢病毒是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒。在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以病毒RNA為模版合成從DNA,再通過(guò)DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯等過(guò)程形成病毒顆粒。HIV慢病毒表達(dá)系統(tǒng)是一種新的重組蛋白高效表達(dá)系統(tǒng),由HIV慢病毒載體(病毒載體已去除致病基因,可插入目的基因或siRNA序列)、輔助載體(表達(dá)病毒包裝需要的蛋白質(zhì),如:VsVg,gag/pol,Tat,Rev)和包裝細(xì)胞系組成。HIV慢病毒載體在外源基因表達(dá)、基因沉默、基因治療、生物制藥等得到廣泛的應(yīng)用。
服務(wù)優(yōu)勢(shì)
1轉(zhuǎn)染范圍廣,可感染各種細(xì)胞類(lèi)型,如淋巴細(xì)胞、肝細(xì)胞、肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等。
2 轉(zhuǎn)入的外源基因可完全整合到染色體上,可建立穩(wěn)定表達(dá)外源基因的細(xì)胞系。
3 對(duì)細(xì)胞感染率高,可達(dá)100%。
4 感染細(xì)胞不產(chǎn)生病變。
服務(wù)內(nèi)容:
穩(wěn)定沉默目的基因
服務(wù)流程:
1 設(shè)計(jì)shRNA序列
2 構(gòu)建含目的基因shRNA的 HIV慢病毒表達(dá)載體
3 表達(dá)載體和輔助質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞
4 收集HIV慢病毒上清
5 濃縮病毒濾液,測(cè)定病毒低度
6 將適當(dāng)?shù)味鹊牟《揪鶆蛉鋈氪腥炯?xì)胞
客戶(hù)提供:
所要敲減的外源基因名稱(chēng)
所研究的細(xì)胞株
我們提供:
提供重組后的HIV慢病毒載體,穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系的qPCR和Western檢測(cè)結(jié)果