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技術(shù)服務(wù)描述

GST-pull-down:

利用GST融合蛋白沉降技術(shù)，將靶蛋白與GST標簽蛋白在細菌體內(nèi)進行融合表達，純化獲取融合表達蛋白。其原理是：靶蛋白-GST融合蛋白親和固化在谷胱甘肽親和樹脂上，作為與目的反比親和的支撐物，充當(dāng)誘餌蛋白，目的蛋白溶液裹住純化，即可捕獲與之相互作用的俘獲蛋白，洗脫結(jié)合物，通過SDS-page電泳分析，或聯(lián)用WB和MS檢測，可驗證蛋白間的相互作用或篩選獲取相應(yīng)的目的蛋白。我們公司通過磁珠結(jié)合捕獲，形成復(fù)合體形式，更加靈敏和針對性獲取結(jié)合蛋白：磁珠與GST抗體孵育結(jié)合，通過與樣品裂解液孵育，形成磁珠-GST抗體-GST融合蛋白-互作結(jié)合蛋白綜合體，進而純化獲取目的結(jié)合蛋白

服務(wù)流程：

   1.構(gòu)建GST-靶蛋白融合表達載體

2. GST標簽抗體，WB檢測融合蛋白的表達情況

3.  細胞裂解，獲取總蛋白裂解液

4.  GST-pull-down調(diào)取互作結(jié)合蛋白

5.  對結(jié)合蛋白進行純化

客戶提供：

1.  已驗證含有融合蛋白表達的樣品（驗證表達融合蛋白的WB結(jié)果圖）

2.  可用于WB檢測和IP實驗的GST標簽抗體

賽誠提供：

   1.原始數(shù)據(jù)、結(jié)果圖片

   2.標準實驗報告

   3.SCI標準Result Figure