廣州市黃埔區(qū)學(xué)大道攬?jiān)侣窂V州企業(yè)孵化器B座402
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項(xiàng)目名稱：Co-IP
所屬分類：IP類實(shí)驗(yàn)
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技術(shù)服務(wù)描述
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。
其原理是：當(dāng)細(xì)胞在非變性條件下被裂解時(shí)，完整細(xì)胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來。如果用蛋白質(zhì)X的抗體免疫沉淀X，那么與X在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)Y也能沉淀下來。目前多用精制的prorein A預(yù)先結(jié)合固化在argarose的beads上，使之與含有抗原的溶液及抗體反應(yīng)后，beads上的prorein A就能吸附抗原達(dá)到精制的目的。這種方法常用于測定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合；也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔。
其優(yōu)點(diǎn)為：（1）相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的，處于天然狀態(tài)；（2）蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進(jìn)行的，可以避免人為的影響；（3）可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。缺點(diǎn)為：（1）可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用；（2）兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合可能不是直接結(jié)合，而可能有第三者在中間起橋梁作用；（3）必須在實(shí)驗(yàn)前預(yù)測目的蛋白是什么，以選擇最后檢測的抗體，所以，若預(yù)測不正確，實(shí)驗(yàn)就得不到結(jié)果，方法本身具有冒險(xiǎn)性。
服務(wù)流程
1. 樣本總蛋白提取及與特定抗體反應(yīng)
2. 用Protein A/G捕獲特定的抗體-蛋白復(fù)合物
3. 洗滌去掉未被捕獲的蛋白，得到純蛋白抗體復(fù)合物
4. 通過Western-Blot檢測IP結(jié)果
5. 數(shù)據(jù)處理及Figure制作
客戶提供（實(shí)驗(yàn)?zāi)康模貉芯?/span>Protein A與Protein B是否結(jié)合）
1. 目的蛋白信息（Protein A、Protein B）
2. 需檢測的細(xì)胞樣品（Protein A、Protein B均可表達(dá)，可不需陽性樣）
3. 適用于IP的一抗（Protein A）及其說明書
4. 適用于Western Blot的一抗（Protein B）及其說明書
賽誠提供
1. 原始數(shù)據(jù)、結(jié)果圖片
2. 標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)報(bào)告
3. SCI標(biāo)準(zhǔn)Result Figure