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產(chǎn)品名稱:CO-IP
品牌名稱:廣州賽誠生物科技有限公司
所屬分類:CO-IP
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- 產(chǎn)品描述
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免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。
其原理是:當(dāng)細(xì)胞在非變性條件下被裂解時,完整細(xì)胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來。如果用蛋白質(zhì)X的抗體免疫沉淀X,那么與X在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)Y也能沉淀下來。目前多用精制的prorein A預(yù)先結(jié)合固化在argarose的beads上,使之與含有抗原的溶液及抗體反應(yīng)后,beads上的prorein A就能吸附抗原達(dá)到精制的目的。這種方法常用于測定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合;也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔。
其優(yōu)點為:(1)相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的,處于天然狀態(tài);(2)蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進(jìn)行的,可以避免人為的影響;(3)可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。缺點為:(1)可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用;(2)兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合可能不是直接結(jié)合,而可能有第三者在中間起橋梁作用;(3)必須在實驗前預(yù)測目的蛋白是什么,以選擇最后檢測的抗體,所以,若預(yù)測不正確,實驗就得不到結(jié)果,方法本身具有冒險性。
服務(wù)流程
1. 樣本總蛋白提取及與特定抗體反應(yīng)
2. 用Protein A/G捕獲特定的抗體-蛋白復(fù)合物
3. 洗滌去掉未被捕獲的蛋白,得到純蛋白抗體復(fù)合物
4. 通過Western-Blot檢測IP結(jié)果
5. 數(shù)據(jù)處理及Figure制作
客戶提供(實驗?zāi)康模貉芯?/span>Protein A與Protein B是否結(jié)合)
1. 目的蛋白信息(Protein A、Protein B)
2. 需檢測的細(xì)胞樣品(Protein A、Protein B均可表達(dá),可不需陽性樣)
3. 適用于IP的一抗(Protein A)及其說明書
4. 適用于Western Blot的一抗(Protein B)及其說明書
賽誠提供
1. 原始數(shù)據(jù)、結(jié)果圖片
2. 標(biāo)準(zhǔn)實驗報告
3. SCI標(biāo)準(zhǔn)Result Figure